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玉米基因轉化的離體子房注射及其轉基因植株的鑒定
用微量注射法對玉米(Zea mays L.)進行基因轉化已獲得成功, 但這種方法是在田間進行的,污染較大, 操作時勞動強度大,轉化率低,而且受氣溫影響,氣溫下降則種子不能成熟.采用離體注射培養(yǎng)法,取下授粉24 h后的玉米雌穗,剝去苞葉,在超凈工作臺進行微量注射,然后切成小塊放在培養(yǎng)瓶中,在光照培養(yǎng)箱內培養(yǎng),3~4周可直接獲得種子.這種方法克服了非離體培養(yǎng)的缺點,提高了轉化效率.種子萌發(fā)后進行植株抗性篩選和分子檢測, 得到了具抗性的、PCR 和Southern雜交結果均為陽性的轉基因植株.
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