根癌農桿菌介導的百脈根遺傳轉化體系的優(yōu)化研究

百脈根(Lotus corniculatus L.)是世界著名的多年生優(yōu)良豆科牧草之一,也是常見的庭院觀賞植物.本文通過比較不同根癌農桿菌轉化百脈根的效率和優(yōu)化百脈根子葉遺傳轉化的條件,建立了一套有效的遺傳轉化體系.實驗結果表明,EHA105作為宿主菌對百脈根進行轉化較LBA4404和GV3101具有更高的轉化率;5 d苗齡的子葉最適合作為轉化的外植體;浸染過程中0.05 MPa負壓處理5 mim以及在共培養(yǎng)培養(yǎng)基中添加20 mg/L的乙酰丁香酮均可提高轉化效率.卡那霉素抗性植株經3次選擇繼代培養(yǎng)后,PCR檢測全部為陽性.對部分PCR陽性植株進行PCR-Southern雜交,證實PCR產物真實可靠,表明外源基因已整合進入百脈根基因組中.

作 者： 孫艷香 楊紅梅 耿云紅 朱曄榮 王寧寧 王勇 Sun Yanxiang Yang Hongmei Geng Yunhong Zhu Yerong Wang Ningning Wang Yong   作者單位： 孫艷香,Sun Yanxiang(南開大學,生命科學學院,天津,300071;河北廊坊師范學院,生物系,河北,廊坊,060051)

楊紅梅,耿云紅,朱曄榮,王寧寧,Yang Hongmei,Geng Yunhong,Zhu Yerong,Wang Ningning(南開大學,生命科學學院,天津,300071)

王勇,Wang Yong(南開大學,生命科學學院,天津,300071;天津市農業(yè)生物技術研究中心,天津,300192) 

刊 名： 南開大學學報（自然科學版）  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NANKAIENSIS(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 39(2)  分類號： Q78  關鍵詞： 百脈根   根癌農桿菌   遺傳轉化   苗齡   AS   負壓處理  

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